Skripsi
Skrining faktor-faktor yang berpengaruh pada fermentasi keratinase dari isolat bacillus haynesii bk1h menggunakan metode One Factor At a Time (OFAT) dan Plackett-Burman Design (PBD) / Isna Firli Masruroh
Abstrak
Keratinase adalah kelas protease yang mendegradasi keratin menjadi polipeptida dan asam amino dengan memutus ikatan peptida dan disulfida pada protein keratin. Protease merupakan salah satu enzim industri terbesar pasar protease global meningkat pesat setiap tahunnya. Pada penelitian sebelumnya telah diisolasi mikroba penghasil keratinase dari Bledug Kuwu yang diidentifikasi sebagai Bacillus haynesii BK1H. Namun penelitian lebih lanjut perlu dilakukan untuk mengoptimalkan produksi dengan mengamati faktor lingkungan mikro yang mempengaruhi produksi keratinase. Dalam penelitian ini skrining beberapa faktor lingkungan mikro dilaporkan. Skrining yang dilakukan meliputi sumber karbon jenis dan konsentrasi ion logam kecepatan agitasi jumlah inokulum pH dan suhu. Skrining faktor-faktor tersebut diawali dengan metode One Factor at A Time (OFAT) dan dilanjutkan dengan metode Plackett-Burman Design (PBD). Dalam penelitian ini dilakukan beberapa tahap (1) Regenerasi Mikroba Bacillus haynesii BK1H (2) Pembuatan Larutan Seri Standar Tirosin (3) Skrining Faktor-Faktor yang Mempengaruhi Fermentasi Protease Bacillus haynesii BK1H dengan Menggunakan Metode One Factor at A Time dan (4) Penentuan Faktor Berpengaruh Signifikan dengan Menggunakan Desain Plackett-Burman (PBD). Hasil pendekatan OFAT menunjukkan bahwa kondisi produksi keratinase terbaik dihasilkan pada penambahan sumber karbon berupa sekam padi dengan sebesar 1% pH 7 suhu 35 deg C jumlah inokulum 1% kecepatan agitasi 150 rpm konsentrasi magnesium sulfat 0 04 g/mL dan konsentrasi kalsium klorida 0 0005 g/mL. Pembuktian faktor-faktor tersebut menggunakan PBD menegaskan bahwa hanya tambahan sekam padi konsentrasi magnesium sulfat dan kalsium klorida serta kecepatan pengadukan yang secara signifikan penting terhadap produksi keratinase pada batas tingkat percobaan yang dipilih.