Skripsi

Kajian perbedaan reagen isolasi protein terhadap ekspresi irs-1 dan glut4 pada jaringan adiposa putih pada tikus galur wistar dengan menggunakan metode western blot semi-dry / Yulia Dewi Wulandari

Abstrak
Abstrak Jaringan adiposa putih memiliki peranan yang penting untuk studi proteomik terkait patofisiologi obesitas dan diabetes melitus tipe 2. Isolasi dan analisis dari jaringan adiposa putih menjadi tantangan karena kandungan lipidnya yang tinggi. Tujuan penelitian ini ialah 1) mengukur konsentrasi protein dari jaringan adiposa putih dengan menggunakan dua reagen isolasi yang berbeda yaitu reagen RIPA Buffer dan TRIzol 2) menganalisis ekspresi protein IRS-1 GLUT4 dan beta -actin di jaringan adiposa putih tikus wistar dengan menggunakan metode western blot dan 3) mengkaji perbedaan penggunaan reagen RIPA Buffer dan TRIzol pada isolasi protein di jaringan adiposa putih terhadap ekspresi protein IRS-1 GLUT4 dan beta -actin dengan menggunakan metode western blot semi-dry. Penelitian ini merupakan penelitian kualitatif yang dilakukan secara eksperimental di BRIN PUSPITEK Serpong. Sampel yang digunakan dalam penelitian ini adalah jaringan adiposa putih pada tikus. Tahapan penelitian yang dilakukan ialah aklimatisasi tikus pembedahan tikus isolasi protein dengan menggunakan reagen RIPA Buffer dan TRIzol pengukuran konsentrasi protein SDS-PAGE transfer membran dan visualisasi pita protein atau biasa disebut dengan Wetsern Blot. Hasil pengukuran konsentrasi protein yang diisolasi dengan reagen TRIzol lebih tinggi (15 965 mg/mL) dibandingkan dengan RIPA Buffer (9 726 mg/mL). Namun kemurnian protein yang dihasilkan dari isolasi dengan reagen RIPA Buffer (0 76) lebih tinggi dibandingkan dengan TRIzol (1 76). Hasil penelitian menunjukkan bahwa pita protein target IRS-1 (131 kDa) GLUT4 (45 kDa) dan beta -actin (42 kDa) dengan menggunakan RIPA buffer dapat tervisualisasikan dengan jelas sedangkan hasil visualisasi pita protein target (IRS-1 dan GLUT4) dengan menggunakan reagen TRIzol tidak dapat tervisualisasikan dengan jelas. Adapun visualisasi pita protein beta -actin menggunakan reagen TRIzol lebih tebal dibandingkan dengan pita protein beta -actin menggunakan reagen RIPA buffer. Berdasarkan hasil penelitian dapat disimpulkan bahwa konsentrasi protein hasil isolasi dengan menggunakan reagen TRIzol lebih tinggi dibandingkan dengan RIPA Buffer visualisasi protein target (IRS-1 dan GLUT4) tampak lebih jelas pada isolasi menggunakan reagen RIPA Buffer dan pita protein housekeeping beta -actin dapat tervisualisasikan dengan menggunakan kedua reagen.

Informasi Detail

DDC

-

Prodi

Universitas Negeri Malang. Program Studi Biologi, 2024.

Deskripsi Fisik

xii, 43 hlm. : ilus.

Bahasa

Indonesia

No Reg

4046/RS/24

Edisi

Skripsi (Sarjana)--Universitas Negeri Malang. 2024

Subjek

1. TIKUS GALUR WISTAR - METODE WESTERN BLOT SEMI-DRY KAJIAN
2. WISTAR STRAIN RATS - WESTERN BLOT SEMI-DRY STUDY METHOD

Pembimbing

1. Prof. Dr. Dra. Utami Sri Hastuti, M.pd

Lampiran Berkas