No image available for this title

Skripsi

Optimasi ekspresi ekstraseluler prekusor insulin glargine menggunakan pichia pastoris rekombinan yang mengandung plasmid ppicza-glargine dan pemurniannya menggunakan kromatografi penukar kation / Muhibbatul Ma\'rifah

Abstrak
Insulin glargine merupakan insulin manusia yang mengalami modifikasi minor (Insulin analog) sehingga kemampuannya membantu menurunkan kadar glukosa lebih lama (24 jam) yang dirancang untuk memenuhi kebutuhan tubuh sepanjang hari dengan satu kali injeksi yang telah banyak digunakan untuk pengobatan diabetes melitus di Indonesia. Prekursor insulin glargine dapat diproduksi dalam organisme Pichia pastoris yang mengandung plasmid pPICZaglargine. Pichia pastoris rekombinan ditumbuhkan pada media YPD yang mengandung zeocin kultur starter tersebut dipindahkan pada media BMMY dan diinkubasi selama 24 jam induksi dengan metanol dilakukan untuk mengekspresi ekstraseluler prekursor insulin glargine. Oleh karena itu tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui optimasi ekspresi ekstraseluler prekursor insulin glargine menggunakan Pichia pastoris rekombinan meliputi waktu induksi dan suhu inkubasi serta pemurniannya menggunakan kromatografi penukar kation yang meliputi volume dan laju alir. Penelitian dilakukan secara laboratoris dan terdiri dari 6 tahapan yaitu (1) Peremajaan sel Pichia pastoris rekombinan yang mengandung plasmid pPICZaglargine (2) Pembuatan starter produksi prekursor insulin glargine secara ekstraseluler (3) Ekspresi prekursor insulin glargine (4) Karakterisasi ekspresi protein (5) Pemurnian ekstrak kasar prekursor insulin glargine dengan kromatografi penukar kation (6) Karakterisasi ekstrak kasar prekursor insulin glargine menggunakan HPLC Hasil penelitian menunjukan bahwa fermentasi Pichia pastoris dalam mengekspresikan prekursor insulin glargine pada media BMMY optimal pada suhu 25 deg C dengan lama waktu induksi 120 jam. Pemurnian prekursor insulin glargine dengan kromatografi penukar kation optimal 50 mL dengan pengaturan laju alir 5 mL/menit. Namun hasil pemurnian belum sepenuhnya murni berdasarkan analisis HPLC.

Informasi Detail
DDC
SKRIPSI DIGITAL
Prodi
Universitas Negeri Malang. Program Studi Bioteknologi, .
Deskripsi Fisik
29 hlm. : ilus.
Bahasa
Indonesia
No Reg
0860/RS/25
Edisi
Skripsi (Sarjana)--Universitas Negeri Malang. 2020
Subjek
1. INSULIN GLARGINE - EKSPRESI EKSTRASELULER - PICHIA PASTORIS
2. PEMURNIAN PROTEIN - KROMATOGRAFI PENUKAR KATION - PLASMID REKOMBINAN
3. INSULIN GLARGINE - EXTRACELLULAR EXPRESSION - PICHIA PASTORIS
Pembimbing
1. Dr. Norman Yoshi Haryono, S.si; 2. Dr. Efrida Martius S. Tp
Lampiran Berkas